技術概況：控制農產品中農藥殘留的關鍵環節之一就是要利用蔬菜農藥殘留快速檢測技術，對農產品中農藥殘留量及時、準確的分析檢測，將對政府部門決策提供科學依據。目前廣泛使用農藥殘留檢測方法主要有色譜檢測法和速側儀法。速測儀法因其成本低、快速、簡便、能夠檢測大批量樣本、對于檢測人員的技術水平要求不高以及適宜推廣于基層技術人員等特點。成為國內應用為廣泛的農藥殘留快速檢測方法，主要用于蔬菜、水果生產基地和批發市場中產品有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留超標情況的快速檢測。

技術要點：

1、儀器設備：RP-410型農藥殘留速測儀

2、試劑及準備

（1）緩沖液：取一包一定比例的磷酸氫二鈉+磷酸二氫鉀，加1000毫升蒸餾水溶解，調pH至8。

（2）酶：加3毫升緩沖液，放入冰塊，保持低溫，維持酶活性。

（3）顯色劑：加10毫升緩沖液溶解備用。

（4）底物：加10毫升緩沖液溶解備用。

3、樣品前處理方法

（1）取樣：選取表面干凈的待檢蔬菜，葉菜類用取樣器隨機取不同植株的葉片，果瓜菜類用取樣器沿皮取約1厘米的樣品。葉菜類取材2克，非葉菜類取4克。

（2）提取：將所取蔬菜樣品切碎放入提取瓶中，加入20毫升提取試劑，震蕩１~2分鐘，倒出上清液，靜置3~5分鐘，即為樣品提取液。倒出上清液時，倒入口徑較小的試管中，這樣便于下一步移液操作。往試管里倒上清液時，尤其是葉菜類樣品，要格外小心，盡量不要把碎葉片倒出，否則，將堵塞移液槍的管嘴，處理時相當困難。

（3）培養：取5只平底小試管，1支為空白對照，依次加入50μL酶，3毫升提取試劑，50微升L顯色劑；其他4支為樣品，分別依次加入50微升酶，3毫升樣品提取試液，50μL顯色劑，在37~38℃下培養30分鐘。首先，要注意保持酶、提取試劑（樣品提取液）、顯色劑時間上的一致性，要迅速地將樣品分別加入5支平底小試管中，然后將50微升酶和3毫升提取試劑分別加入5支平底小試管中，將顯色劑分別加入5支平底小試管中；其次，培養溫度要嚴格控制在37℃-38℃之間，培養過程中溫度發生變化，超出范圍，直接影響測定結果，溫度低于37℃，抑制率偏低，溫度高于38℃，抑制率偏高。培養時間要嚴格控制為30分鐘，時間少于30分鐘，抑制率偏低，時間多于30分鐘，抑制率偏高。

（4）結果檢測與分析

將培養后的5支平底小試管內分別加入50微升底物，然后迅速倒入比色杯內，放入RP-410中進行檢測，如動作緩慢將會導致抑制率偏高。空白試管對應的比色杯要放在儀器的外一格中，否則，檢測結果無效。比色杯放入后，要按空白鍵，若按了樣品鍵，檢測結果亦無效。RP-410每次可檢測5個樣品，若檢測多個樣品時，可繼續檢測，不必再設空白對照，5個樣品為一組。

檢測完畢，儀器將自動打印出檢測結果，即每個樣品的抑制率。抑制率<70%，樣品合格；抑制率≥70%，樣品不合格。若抑制率≥70%的樣品，蔬菜中可能含有某種有機磷或氨基甲酸酯類農藥殘留，此時樣品要有兩次以上重復試驗，幾次重復檢測的重現性應在80%以上，才能判定此樣品是否合格。抑制率在-10%~70%之間，均屬正常，一旦抑制率超出此范圍，則表示操作失誤，需重新檢測。

注意事項：

1、該方法適用于新鮮蔬菜和水果上的農殘留快速檢測，但部分含特殊物質的蔬菜如大蔥、大蒜、韭菜等以及一些菌類如蘑菇等，易得出現假陽性結果。對含殘留量愈高的蔬菜，測定的誤差愈大。不適合用茶葉等干性物質的樣品的檢測。

2、該方法只能檢測有機磷和氨基甲酸酯類農藥，不適用于其他農藥殘留檢測，且只能定性。所以，當用此方法檢測有殘留問題的蔬菜時，如果要作為仲裁處理，應送到有關部門進一步用氣相色譜等儀器進行定性和定量分析，其結果方可作為終結論性數據。

3、在有機磷和氨基甲酸酯類農藥中，也有少部分農藥品種對此方法不夠靈敏（檢出濃度大于30mg/kg）。此酶對以下農藥不敏感：甲基對硫磷、水胺硫磷、甲基異柳磷、毒死蜱、樂果等。

適宜區域：本方法適用于除蔥姜、蘿卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇等以外的葉菜類、果菜類、豆類、瓜菜類蔬菜中，有機磷類和氨基甲酸酯類農藥的定性檢測。